Bộ xét nghiệm chẩn đoán KHB cho kháng nguyên bề mặt viêm gan B (ELISA) Thuốc thử HBsAg

Độ nhạy cao: phân nhóm adr ≤0,1IU/ml, phân nhóm adw ≤0,1IU/ml, phân nhóm ay ≤0,2IU/ml

Khả năng phát hiện mạnh

Kiểm soát chất lượng: Là sản phẩm được chứng nhận GMP, mỗi lô đều được đảm bảo chất lượng trên toàn quốc

Thiết bị vận hành tự động: Máy phân tích miễn dịch men hoàn toàn tự động

Thiết bị vận hành thủ công:

– Bộ điều nhiệt hoặc bồn nước 37 ºC

– Máy dao động vi lỗ

– Micropipette 25 μl -200 μl

– Máy đọc vi mảng: bước sóng phát hiện 450nm, bước sóng tham chiếu 630nm

– Máy rửa vi mảng hoặc máy rửa chai

1. KHB HBsAg là bộ xét nghiệm chẩn đoán in vitro dùng để phát hiện kháng nguyên bề mặt viêm gan B (HBsAg) trong huyết thanh hoặc huyết tương người.

2. Huyết thanh người: toàn bộ mẫu phải được giữ ở nhiệt độ phòng trong 1-2 giờ cho đến khi máu đông lại và co lại sau khi lấy máu, ly tâm ở tốc độ Vòng/phút trong 15 phút, hút huyết thanh để sử dụng.

3. Huyết tương: mẫu máu và thuốc chống đông phải được trộn nhẹ nhàng lộn ngược 6-8 lần sau khi lấy máu, ly tâm hoàn toàn cho đến khi phân lập được huyết tương và tế bào máu, hút huyết tương để sử dụng.

4. Huyết thanh và huyết tương người phải được bảo quản ở nhiệt độ 2 đến 8ºC. Để bảo quản lâu dài, cả huyết thanh và huyết tương người phải được bảo quản ở nhiệt độ -20ºC và tránh đông lạnh và rã đông mẫu nhiều lần.

1. Pha loãng dung dịch rửa cô đặc theo tỷ lệ 1:25 với nước tinh khiết. (Ví dụ: thêm 480ml nước tinh khiết với 20ml dung dịch rửa được trộn đều để có được 500ml chất tẩy rửa có nồng độ làm việc để sử dụng.)

2. Mở túi nhôm và lấy microplate có số dải cần thiết ra.

3. Hút 75ul của mỗi mẫu, đối chứng âm tính và đối chứng dương tính vào các giếng (dành riêng 3 giếng cho đối chứng âm tính, 1 giếng cho đối chứng dương tính và 1 giếng cho mẫu trắng).

4. Đậy microplate bằng chất bịt kín đĩa. Ủ ở 37ºC trong 60 phút.

5. Lấy microplate ra và xé chất bịt kín đĩa, thêm 50ul liên hợp vào các giếng đó có mẫu, đối chứng âm tính và đối chứng dương tính.

6. Rung trong 10 giây trên máy dao động vi xốp hoặc rung nhẹ trong 10 giây bằng tay.

7. Phủ microplate bằng chất bịt kín đĩa. Ủ ở 37ºC trong 30 phút.

8. Lấy microplate ra và xé chất bịt kín đĩa, rửa mỗi giếng bằng dung dịch rửa 5 lần. Nếu rửa thủ công, loại bỏ chất lỏng trong giếng, đổ đầy mỗi giếng bằng dung dịch rửa cô đặc đã đề cập ở Bước 1, sấy khô các dải sau 30 đến 60 giây giữ. Sau 5 lần lặp lại, thấm khô microplate trên khăn giấy thấm sạch. Nếu rửa bằng máy rửa microplate, chọn quy trình rửa 5 lần, đổ đầy mỗi giếng bằng dung dịch rửa cô đặc đã đề cập ở Bước 1 để đảm bảo không còn cặn mỗi lần, thấm khô microplate 
trên khăn giấy thấm sạch sau mỗi lần rửa. 

9. Nhỏ 50ul Chromogen A và 50ul Chromogen B vào mỗi giếng, trộn đều để có độ đồng nhất. 

10. Rung trong 10 giây trên máy dao động vi xốp hoặc rung nhẹ trong 10 giây thủ công.

11. Phủ microplate bằng chất bịt kín đĩa. Ủ ở 37ºC trong 30 phút.

12. Đổ 50ul dung dịch dừng vào mỗi giếng, đảo microplate trong 5 giây để đạt được độ đồng nhất pha trộn hoàn toàn. 

13. Sử dụng máy đọc microplate để đọc, bước sóng 450nm. (Khuyến nghị sử dụng máy đọc microplate có bước sóng kép để đo màu, bước sóng tham chiếu 630nm hoặc tương tự như 630nm.) Nếu cần trừ mẫu trắng sắc tố, trước tiên giếng kiểm soát mẫu trắng sắc tố cần phải được hiệu chỉnh bằng không, sau đó đọc giá trị OD của từng giếng.