Bộ xét nghiệm chẩn đoán kháng thể kháng Treponema Pallidum (ELISA) KHB Anti-TP Reagent

Bộ xét nghiệm chẩn đoán KHB tìm kháng thể Treponema Pallidum (ELISA)

KHB là nhà cung cấp duy nhất các thuốc thử huyết tương nhanh cho bệnh giang mai tại Trung Quốc

Hiệu suất tốt: Kết quả lâm sàng tuyệt vời trong báo cáo của CDC

Kiểm soát chất lượng: Là sản phẩm được chứng nhận GMP, mỗi lô hàng đều được đảm bảo chất lượng trên toàn quốc

Các giếng dải vi mô polystyrene đã được phủ bằng kháng nguyên T. pallidum tái tổ hợp (TP-47 KDa và các kháng nguyên khác) tạo nên kháng thể pha rắn. Mẫu thử nghiệm được ủ trong một giếng như vậy; kháng thể đặc hiệu T. pallidum, nếu có trong mẫu, sẽ liên kết với kháng nguyên được cố định trên các giếng của vi đĩa. Các giếng được rửa để loại bỏ các thành phần không liên kết và các kháng nguyên được gắn nhãn bằng peroxidase cải ngựa được thêm vào các giếng. Các liên hợp enzyme sẽ liên kết với phức hợp kháng nguyên-kháng thể và các liên hợp enzyme không liên kết dư thừa được loại bỏ bằng cách rửa lại. Khi ủ với enzyme, chất nền tạo ra màu xanh lam trong vi giếng, chuyển sang màu vàng khi phản ứng dừng lại bằng axit sunfuric. Nếu mẫu không chứa kháng thể đặc hiệu T. pallidum, kháng thể được gắn nhãn không thể liên kết đặc hiệu và chỉ phát triển màu nền nhạt.

Thiết bị vận hành tự động: Máy phân tích miễn dịch men hoàn toàn tự động

Thiết bị vận hành thủ công:

– Bộ điều nhiệt hoặc bồn nước 37 ºC

– Máy dao động vi lỗ

– Micropipette 25 μl -200 μl

– Máy đọc vi mảng: bước sóng phát hiện 450nm, bước sóng tham chiếu 630nm

– Máy rửa vi mảng hoặc máy rửa chai

1. Bộ xét nghiệm miễn dịch này là một xét nghiệm chẩn đoán in vitro để phát hiện Treponema Pallidum trong huyết thanh hoặc huyết tương của người.

2. Huyết thanh và huyết tương của người nên được bảo quản ở nhiệt độ từ 2 đến 8 ºC.
Để bảo quản lâu dài, cả huyết thanh và huyết tương của người nên được bảo quản ở nhiệt độ -20ºC và tránh đông lạnh-rã đông nhiều lần.

1. Pha loãng dung dịch rửa cô đặc theo tỷ lệ 1:25 với nước tinh khiết. (Ví dụ: thêm 480ml nước tinh khiết với 20ml dung dịch rửa được trộn đều để có được 500ml chất tẩy rửa có nồng độ làm việc để sử dụng.)

2. Mở túi nhôm và lấy microplate có số dải cần thiết ra.

3. Nhỏ mẫu bằng pipet, đối chứng âm tính và đối chứng dương tính riêng biệt ở thể tích 100ul vào mỗi lỗ phản ứng liên quan. (Đề xuất giữ lại 5 lỗ làm lỗ so sánh. Có: 2 lỗ để so sánh âm tính, 1 lỗ để đối chứng dương tính, 1 lỗ để so sánh mẫu trắng nhiễm sắc thể. Người dùng cũng có thể tự điều chỉnh.)

4. Đậy microplate bằng chất bịt kín đĩa. Ủ ở 37ºC trong 60 phút.

5. Lấy microplate ra và xé chất bịt kín đĩa, rửa mỗi lỗ bằng dung dịch rửa 5 lần. Nếu rửa thủ công, đổ chất lỏng trong mỗi lỗ, đổ dung dịch rửa cô đặc đã đề cập ở Bước 1 vào mỗi lỗ và giữ trong 30 – 60 giây với dung dịch rửa cô đặc vào mỗi lỗ trước khi sấy ly tâm. Sau 5 lần lặp lại, thấm khô các đĩa vi mô trên khăn giấy thấm sạch. Nếu rửa bằng máy rửa đĩa vi mô, hãy chọn quy trình rửa 5 lần, đổ dung dịch rửa cô đặc đã đề cập ở Bước 1 vào mỗi lỗ và giữ trong 30 – 60 giây với dung dịch rửa cô đặc vào mỗi lỗ, mọi lỗ phải được hấp thụ hoàn toàn, không có bất kỳ chất cặn nào. Thấm khô các đĩa vi mô trên khăn giấy thấm sạch sau khi rửa.

6. Nhỏ 100ul liên hợp vào các lỗ đó có mẫu vật, đối chứng dương và đối chứng âm đã thêm vào.

7. Rung trong 10 giây trên máy dao động vi xốp hoặc rung nhẹ trong 10 giây bằng tay.

8. Đậy đĩa vi mô bằng chất bịt kín đĩa. Ủ ở 37ºC trong 30 phút.

9. Lấy đĩa vi mô ra và xé chất bịt kín đĩa, rửa mỗi lỗ bằng dung dịch rửa trong 5 lần. Quy trình rửa giống như quy trình được đề cập trong Bước 5.

10. Hút 50ul Chromogen A và 50ul Chromogen B vào mỗi lỗ, trộn đều để có độ đồng nhất.

11. Rung trong 10 giây trên máy dao động vi xốp hoặc rung nhẹ trong 10 giây bằng tay.

12. Đậy microplate bằng chất bịt kín đĩa. Ủ ở 37ºC trong 30 phút.

13. Đổ đầy 50ul dung dịch dừng vào mỗi lỗ, Lắc microplate trong 5 giây để có độ đồng nhất pha trộn hoàn toàn.

14. Sử dụng đầu đọc microplate để đọc và chọn bước sóng ở 450nm. (Khuyến nghị sử dụng đầu đọc microplate bước sóng kép để đo màu, bước sóng tham chiếu 630nm hoặc gần bước sóng ở 630nm.) Nếu cần trừ mẫu trắng nhiễm sắc, giếng điều khiển mẫu trắng nhiễm sắc cần phải được hiệu chỉnh bằng không trước khi đọc giá trị OD của mỗi giếng.